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Título: Avaliação da atividade antimicrobiana do fungo endofítico Paecilomyces lilacinus (THOM) Samson, frente a patógenos presentes em infecção endodôntica
Autor(es): Correia, Flávia Fontes Queiroz
Orientador(es): Souza, Antonia Queiroz Lima de
Palavras-chave: Endodontia;Fungos endofíticos;Antibiose
Data do documento: 28-Abr-2014
Editor: Universidade do Estado do Amazonas
Resumo: A endodontia compreende o estudo conservador e radical da polpa dentária, localizada no interior do sistema de canais radiculares. Quando microrganismos da cavidade oral invadem esse sistema, a polpa dentária entra em necrose tecidual, necessitando sua remoção, limpeza e modelagem dos condutos, para posterior obturação, reduzindo assim os patógenos e permitindo que a defesa do organismo atue, impedindo a progressão e/ou induzindo a regressão da doença. Os microrganismos frequentes em infecções endodônticas são: Enterococcus faecalis, Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus e Candida albicans entre outros. Com o uso indiscriminado dos antibióticos surgiram várias cepas com resistência aos antibióticos atuais, o que justifica a busca de novos antibióticos. Estes são produzidos em quantidades reduzidas por diferentes fontes, entre estas os vegetais e os microrganismos. Para minimizar o extrativismo da flora, há a alternativa de utilizar microrganismos endofíticos, pois estes podem produzir metabólitos similares aos de sua hospedeira. O fungo endofítico Paecilomyces lilacinus foi isolado da planta amazônica Duguetia flagellaris (Anonnaceae), e foi cultivado em meio líquido: batata, dextrose e extrato de levedura durante 16 dias, a 28 °C de modo estático. Depois foi filtrado, separando a parte líquida da sólida (micélio). O meio líquido fermentado foi submetido a extração em fase sólida (SPE), utilizando acetato de etila/metanol 1:1 e metanol 100%, enquanto que o micélio foi extraído em 3 gradientes. Os dois primeiros igual da SPE e finalizado com etanol 100%. Os extratos foram submetidos a evaporação rotativa, seguida de liofilização e depois foi realizado ensaio de antibiose por difusão em ágar e microdiluição. Todos os cinco extratos apresentaram bons resultados. Para C. albicans e E. faecalis a dosagem mínima inibitória (MID) dos melhores extratos (G2 e G4) foi 62,5 µg/mL. Para S. aureus e P. aeruginosa o MID foi menor que 7,81µg/mL para G4. Estes resultados levaram ao fracionamento dos extratos, as análises em cromatografia em camada delgada (CCD), a novos ensaios de microdiluição, bioautografia e descontaminação dos cones de guta percha. Todos os dados obtidos corroboram com a presença de no mínimo seis diferentes moléculas com essas atividades. O fracionamento melhorou o MID para C. albicans com 15,62 µg/mL e para os outros extratos não apresentou melhora significativa. A autobiografia com as melhores frações e seus extratos de origem evidenciaram bons resultados para C. albicans, S. aureos e P. aeruginosa. A descontaminação dos cones de guta percha foi conduzida com controle de tetraciclina, amplicilina, nistatina e hipoclorito e apresentou resultado semelhante aos controles, contudo melhores que o descrito na literatura. Os extratos e frações de P.lilacinus apresentam resultados promissores da inibição de crescimento bacteriano e fungico, podendo ser fonte de compostos para aplicação na odontologia ou em outras áreas da saúde. Palavras chave: endodontia, fungos endofíticos, antibiose.
Abstract: Endodontics comprises the conservative and radical study of dental pulp, located within the root canals system. Once that oral microorganisms invade this system, the dental pulp enters in tissue necrosis, necessitating its removal, cleaning and shaping of the canals for posterior fillings, thereby reducing pathogens and allowing the body's defense to act, by preventing the progression and / or inducing regression of the disease. The common microorganisms in endodontic infections, which were used in this study are: Enterococcus faecalis, Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus and Candida albicans. With the widespread use of antibiotics, several strains with resistance to current antibiotics has appeared, what justifies the search for new drugs of the genre. These are produced in small quantities by different sources, among them, plants and microorganisms. To minimize the extraction of flora, there is the alternative of using the endophytic microorganisms, since they may produce similar metabolites of those from its host. The endophytic fungus Paecilomyces lilacinus was isolated from the Amazonian plant Duguetia flagellaris (Anonnaceae), and it was cultured in broth: potato, dextrose and yeast extract for 16 days, at 28°C in a static mode. Then it was filtered, by separating the liquid portion (broth with secondary metabolites) from the solid one (mycelium). The broth was submitted to SPE extraction by using ethyl acetate / methanol 1:1 and methanol 100%, while the mycelium was extracted in 3 gradients. The first two gradients were equal of the SPE, and the last one was finished with 100% ethanol. The extracts were submitted to rotary evaporation, followed by lyophilization, and subsequently the antibiosis test by agar diffusion and microdilution was made. All the five extracts presented good results. For C. albicans and E. faecalis, the MID for the best extracts was (G2 and G4) with 62.5 mg / mL. For S. aureus and P. aeruginosa, it was (G4) less than 7.81 mg / mL. These results led to the fractionation of the extracts, to analyzes in CCD, to new tests of microdilution, bioautographic and decontamination of Gutta-Percha cones. All the obtained data corroborate the presence of at least six different molecules with these activities. The fractionation improved the MID for C. albicans with 15.62 mg / mL and to the other extracts presented no significant improvement. The bioautography with the best fractions and their extracts of origin showed good results for C. albicans, S. aureus and P. aeruginosa. The decontamination of Gutta-Percha cones was conducted with control of tetracycline, ampicillin, nystatin and sodium hypochlorite, presenting similar result to the controls. The extracts and fractions of P.lilacinus presented promising results of the inhibition of bacterial and fungal growth, and can be a source of compounds for use in dentistry or other health areas. Keys-words: endodontic, endophytic fungi, antibiosis.
URI: http://repositorioinstitucional.uea.edu.br//handle/riuea/2351
Aparece nas coleções:DISSERTAÇÃO - MBT Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia e Recursos Naturais da Amazônia



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