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Título: Produção de estoques virais centrifugados e ultracentrifugados do denv-2 para comparação dos títulos virais
Título(s) alternativo(s): Production of centrifuged and ultracentrifuged denv-2 viral stocks for comparison of viral titers
Autor(es): Oliveira, Mauricio Silva de
Orientador(es): Ferreira, Rosilene Gomes da Silva
Palavras-chave: Arboviroses;Massa viral;Titulação viral;Arboviruses;Viral mass;Viral titration
Data do documento: 11-Nov-2019
Editor: Universidade do Estado do Amazonas
Citação: OLIVEIRA, Mauricio Silva de. Produção de estoques virais centrifugados e ultracentrifugados do denv-2 para comparação dos títulos virais. 2019. 41 f. TCC (Graduação em Ciências Biológicas) - Universidade do Estado do Amazonas, Manaus.
Resumo: O arbovírus Dengue representa um grande desafio para a Saúde Pública em muitos de seus aspectos. Esta pesquisa justifica-se pela importância de estabelecer um estoque de massa viral in vitro com células C6/36 infectadas por DENV-2 para que sejam possíveis estudos posteriores pelos grupos de pesquisas, que testam produtos naturais da Amazônia. Os objetivos foram: induzir a multiplicação do DENV-2 em linhagem celular do mosquito Aedes albopictus, C6/36; comparar a titulação de cada estoque viral por meio da Plaque Forming Units (PFU) em células VERO (células do rim de macaco-verde africano), após a centrifugação e ultracentrifugação; e diferenciar as titulações virais, centrifugadas e ultracentrifugadas. A produção das massas virais de Dengue foi realizada em células C6/36. Para a titulação viral, células VERO foram semeadas em placas de 6 poços e infectadas com DENV-2 ultracentrifugado para posterior contagem das colônias virais, por meio da técnica de PFU. Porém, o experimento não demonstrou positividade, alguns fatores podem ter influenciado: a agarose não solidificou quando adicionado o corante vermelho neutro, o próprio corante pode ter gerado influência, o processo de ultracentrifugação por meio da rotação em 45.000 g durante 90min a 4 ºC pode ter danificado o estoque viral ou a falta de infecção. Portanto, foi possível realizar a indução da multiplicação de células em linhagens de mosquitos C6/36, proceder à centrifugação das células infectadas por DENV-2 e ultracentrifugação. Não foi possível analisar e comparar a titulação de cada estoque viral por meio da técnica de PFU, após a centrifugação e ultracentrifugação. Novos testes devem ser realizados a fim de comparar os estoques virais, possibilitando possíveis estudos que testem produtos naturais da Amazônia. Palavras-chave: Arboviroses; Massa viral; Titulação viral.
Abstract: Dengue arbovirus represents a major challenge for Public Health in many of its aspects. This research is justified by the importance of establishing an in vitro viral mass stock with C6/36 cells infected by DENV-2, so that further studies are possible by research groups, which test natural products from the Amazon. The objectives were: to induce the multiplication of DENV-2 in cell strain of the aedes albopictus mosquito, C6/36; compare the titration of each viral stock through Plaque Forming Units (PFU) in VERO cells (African green monkey kidney cells), after centrifugation and ultracentrifugation; and differentiate viral, centrifugated and ultracentrifugated titrations. The production of dengue viral masses was performed in C6/36 cells. For viral titration, VERO cells were seded into plates of 6 wells and infected with ultracentrifugated DENV-2 for subsequent count of viral colonies, using the PFU technique. However, the experiment did not show positivity, some factors may have influenced: agarosis did not solidify when the neutral red dye was added, the dye itself may have generated influence, the ultracentrifugation process by rotating at 45,000 g during 90min at 4 ºC may have damaged viral stock or lack of infection. Therefore, it was possible to induce the multiplication of cells in c6/36 mosquito strains, centrifuge of cells infected by DENV-2 and ultracentrifugation. It was not possible to analyze and compare the titration of each viral stock using the PFU technique, after centrifugation and ultracentrifugation. Further tests should be carried out in order to compare viral stocks, enabling possible studies that test natural products from the Amazon. Keywords: Arboviruses; Viral mass; Viral titration.
URI: http://repositorioinstitucional.uea.edu.br//handle/riuea/3638
Aparece nas coleções:ENS - Trabalho de Conclusão de Curso de Graduação



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