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http://repositorioinstitucional.uea.edu.br//handle/riuea/2388Registro completo de metadados
| Campo DC | Valor | Idioma |
|---|---|---|
| dc.contributor.author | Rocha, Marla Raquel Pontes da | - |
| dc.date.available | 2020-03-18 | - |
| dc.date.available | 2020-03-19T00:58:28Z | - |
| dc.date.issued | 2012-05-24 | - |
| dc.identifier.uri | http://repositorioinstitucional.uea.edu.br//handle/riuea/2388 | - |
| dc.description.abstract | Gene expression studies in mosquitoes have given relevant information on the implementation of vector control strategies. The profile of gene expression can be modified by environmental factors and one example is the petroleum which has toxic organic compounds in its composition being therefore a stressor agent. Petroleum exploration in the Amazon region is growing and in the municipality of Coari-AM is located the Urucu petroliferous province with intense oil exploration and refined petroleum products. In this work, the petroleum was analyzed as a stressor agent to Anopheles darlingi Root, 1926, the main vector of human malaria in the Amazon. For this, larvae of A. darlingi were collected from riverine habitats near the east zone of Manaus town. The stress effects of petroleum were evaluated by gene expression analyzes in larvae of A. darlingi under natural conditions and stress exposure. Toxic bioassays were developed with the objective to establish an experimental design of CL50 and then proceed to the molecular analyzes. For gene expression evaluation cDNA libraries were constructed and sequencing was established by Sanger sequencing and Transcriptome Sequencing (RNA-seq) to obtain Expressed Sequence Tags (ESTs). The data from the gene expression profiles of cDNA libraries from control (larvae in natural conditions) and treatment (larvae under petroleum stress) were analyzes by the bioinformatic program BLAST2GO. In the bioassays of CL50 the concentrations were determined at 0.32 ppm and 0.06 ppm which the larvae of A. darlingi was subjected to stress for further gene expression analyzes. The obtained results showed the representativity of ESTs from the control and treatment libraries. Among the differentially expressed genes in the treatment were the family hsp known by encoding proteins involved in thermal shock, the enzymatic group tps responsible by the terpene biosynthesis and the ctnb related to the oxidoreductase biosynthesis, being all related to stress caused by petroleum. These genes are related to detoxification of organism metabolism indicating important processes of pesticide resistance and the tps can be considered as a marker of exposure to petroleum. In addition to the genes differentially expressed in the treatment, the gly gene was observed and is related to the transcription of glycine-rich proteins (GRPs), and as it was expressed in both libraries it has the possibility of being a normalize for both conditions. Therefore, the observed parameters of gene expression in larvae of A. darlingi establish new perspectives to the species functional genomics. Key-words: Anopheles darlingi; Gene expression; Sanger-CE; NGS-RNAseq; Petroleum; Environmental stress | pt_BR |
| dc.language | por | pt_BR |
| dc.publisher | Universidade do Estado do Amazonas | pt_BR |
| dc.rights | Acesso Aberto | pt_BR |
| dc.rights | Atribuição-NãoComercial-SemDerivados 3.0 Brasil | * |
| dc.rights.uri | http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/3.0/br/ | * |
| dc.subject | Anopheles darlingi | pt_BR |
| dc.subject | Expressão gênica | pt_BR |
| dc.subject | Sange | pt_BR |
| dc.subject | NGS-RNAseq | pt_BR |
| dc.subject | Petróleo | pt_BR |
| dc.title | Análise da expressão gênica de Anopheles darlingi (Diptera, Culicidae) em condições naturais e no laboratório sob estresse produzido pelo petróleo | pt_BR |
| dc.type | Dissertação | pt_BR |
| dc.date.accessioned | 2020-03-19T00:58:28Z | - |
| dc.contributor.advisor-co1 | Nozawa, Sergio Ricardo | - |
| dc.contributor.advisor-co1Lattes | http://lattes.cnpq.br/4051595462956016 | pt_BR |
| dc.contributor.advisor1 | Tadei, Wanderli Pedro | - |
| dc.contributor.advisor1Lattes | http://lattes.cnpq.br/6806722604010480 | pt_BR |
| dc.contributor.referee1 | Tadei, Wanderli Pedro | - |
| dc.contributor.referee1Lattes | http://lattes.cnpq.br/6806722604010480 | pt_BR |
| dc.creator.Lattes | http://lattes.cnpq.br/4002366994511356 | pt_BR |
| dc.description.resumo | Estudos da expressão gênica em mosquitos têm proporcionado informações relevantes para a implementação de estratégias de controle vetorial. O perfil da expressão gênica pode ser alterado por fatores ambientais e um exemplo é o petróleo que apresenta compostos orgânicos tóxicos em sua composição, tornando-se um agente estressor. A exploração de petróleo na região amazônica está em franca expansão e no município de Coari-AM está situada a Base Petrolífera de Urucu, onde ocorre intensa atividade de extração e também de refino. Neste trabalho analisou-se o petróleo como um agente estressor para Anopheles darlingi Root, 1926, principal vetor da malária humana na Amazônia. Para tanto, utilizaram-se larvas de Anopheles darlingi coletadas em criadouros situados na periferia de Manaus, na Zona Leste. O efeito da ação estressante do petróleo foi avaliado pela análise da expressão gênica em larvas de A. darlingi, em condições naturais e por exposição ao estresse em laboratório. Desta forma, foram realizados bioensaios de toxicidade com o objetivo de estabelecer a CL50 para compor o delineamento experimental e assim prosseguir com a análise molecular. Em continuidade, na avaliação da expressão gênica foram construídas bibliotecas de cDNA e os sequenciamentos destes cDNAs foram realizados pelas tecnologias de Sanger - CE e NGS - RNAseq para a obtenção de EST’s (Expressed Sequence Tags). Os dados dos perfis da expressão gênica das bibliotecas de cDNA controle (larvas em condições naturais) e tratamento (larvas sob estresse pelo petróleo) foram analisados pelo programa de bioinformática BLAST2GO. Nos bioensaios realizados a CL50 foi determinada em 0,32 ppm e 0,06 ppm a concentração, na qual as larvas de A. darlingi foram submetidas ao estresse para as análises de expressão gênica. Os resultados obtidos demonstraram a representatividade das EST`s das bibliotecas controle e tratamento. Dentre os genes diferencialmente expressos no tratamento observou-se a família hsp conhecida por codificar proteínas envolvidas no choque térmico, o grupo enzimático tps responsável pela biossíntese de terpenos e ctnb relacionados com a biossíntese de oxidorredutases, sendo estes intimamente envolvidos com o estresse causado pelo petróleo. Esses genes relacionam-se ao metabolismo de detoxificação do organismo, sendo importantes indicadores dos processos de resistência aos inseticidas e ainda pode-se destacar o tps, no qual pode ser considerado um marcador de exposição para o petróleo. Além dos genes diferencialmente expressos no tratamento, cita-se também o gene gly ligado a transcrição do grupo das Proteínas Ricas em Glicina – GRPs, e como foi expresso nas duas bibliotecas tem a possibilidade de ser um gene normalizador das duas condições. Com isso, os parâmetros de expressão gênica observado em larvas de A. darlingi estabelecem novas perspectivas à genômica funcional da espécie. Palavras-chave: Anopheles darlingi; Expressão gênica; Sanger-CE; NGS-RNAseq; Petróleo; Estresse ambiental | pt_BR |
| dc.publisher.country | Brasil | pt_BR |
| dc.publisher.program | Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia e Recursos Naturais da Amazônia | pt_BR |
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| dc.subject.cnpq | biotecnologia | pt_BR |
| dc.publisher.initials | UEA | pt_BR |
| Aparece nas coleções: | DISSERTAÇÃO - MBT Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia e Recursos Naturais da Amazônia | |
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| Análise da expressão gênica em larvas de Anopheles darlingi Root 1926, sob condições naturais e por exposição no laboratório ao estresse ambiental causado pelo petróleo..pdf | 1,77 MB | Adobe PDF | Visualizar/Abrir |
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