Use este identificador para citar ou linkar para este item:
http://repositorioinstitucional.uea.edu.br//handle/riuea/2368| Título: | Isolamento e caracterização de locos microssatélites e análise da variabilidade genética de duas populações de anopheles (n.) Triannulatus sensu latu (diptera: culicidae) da cidade de Manaus |
| Título(s) alternativo(s): | Isolamento e caracterização de locos microssatélites e análise da variabilidade genética de duas populações de anopheles (n.) Triannulatus sensu latu (diptera: culicidae) da cidade de Manaus |
| Autor(es): | Cruz , Paula Figliuolo da |
| Orientador(es): | Santos, Joselita Maria Mendes dos |
| Palavras-chave: | Anopheles triannulatus;DNA microssatélite;Variabilidade genética;Complexo de espécie;Malária. |
| Data do documento: | 14-Jul-2011 |
| Editor: | Universidade do Estado do Amazonas |
| Resumo: | Anopheles triannulatus é um complexo de espécies crípticas constituido de pelo menos três espécies: Anopheles triannulatus s.s., Anopheles halophylus, e outra ainda não identificada, denominada A. triannulatus C. É uma espécie zoofílica, crepuscular e exofílica. No entanto, tem a capacidade endofágica e antropofílica. Sua importância como transmissora da malária humana ainda é controvertida. A. triannulatus já foi encontrada infectada por Plasmodium vivax e Plasmodium falciparum, sendo considerada uma possível vetora da malária na Venezuela. Diante disso e do seu status taxonômico ainda controvertido, foi construída uma biblioteca genômica enriquecida com microssatélites (SSRs) e estes analisados em duas populações do Amazonas. Esta biblioteca gerou 96 clones com insertos e 84 sequências nucleotídicas de boa qualidade. Dos 75 contigs obtidos, 83 sequências continham SSRs, com apenas 1,31% de redundância. Foram isolados 51 pares de primers. Destes, 15 locos microssatélites foram caracterizados em 25 indivíduos de A. triannulatus coletados no bairro Puraquequara, Manaus (Amazonas). Foram obtidos 88 alelos, variando entre 3 a 10 alelos por loco, com uma media de 6,0 alelos. A heterozigozidade observada (HO) variou entre 0,157 a 0,866, enquanto a heterozigosidade esperada (HE) variou entre 0,322 a 0,843. A amplificação heteróloga de 15 locos microssatélites revelou quatro locos amplificados para todas as espécies (A. benarrochi, A. rangeli, A. oswaldoi e A. darlingi) e quatro para, pelo menos, uma espécie. Para análise da variabilidade genética foram selecionados oito locos que apresentaram maior polimorfismo e número de indivíduos genotipados. Desses oito locos analisados foram obtidos 71 alelos, com uma media de 6,25 e 7,25 alelos por loco em Puraquequara e Janauari, respectivamente. A heterozigosidade observada variou de 0,318 a 0,937 e a esperada variou de 0,455 a 0,838, nas duas populações, indicando elevada variabilidade genética. As estatísticas F de Wright revelaram alta estruturação genética entre as populações (FST= 0,282), indicativa de diferenciação interespecífica para complexos de espécies, a qual foi confirmada pelo elevado valor de distância genética entre as duas populações (D= 1,832) e pelos resultados da análise Bayesiana implementada no programa STRUCTURE, que evidenciou a existência de dois clusters (K=2), sendo considerada duas populações distintas. |
| Abstract: | Anopheles triannulatus is a complex of cryptic species consisting of at least three species: Anopheles triannulatus ss, Anopheles halophylus and another until now not identified species named A. triannulatus C. Yet, A. triannulatus is a zoophilic, twilight and exophilic species. Nevertheless, A. triannulatus has endophagous and anthropophilic abilities. The importance of anopheles triannulatus as a transmitter of human malaria is still an issue. A. triannulatus has been found infected with Plasmodium vivax and Plasmodium falciparum, so is being considered as a possible vector of malaria in Venezuela. Given this, and that its taxonomic status lies upon controversies, it is constructed in this work a genomic library enriched with microsatellites (SSRs) which were analyzed in two populations from the Amazon Region. That library has generated 96 clones with inserts and 84 nucleotide sequences of good quality. Of the 75 contigs obtained, 83 sequences showed to contain SSRs with only 1.31% of inherent redundancy. 51 primers pairs were isolated, from which 15 loci microsatellites were characterized in 25 individuals of A. triannulatus collected in the neighborhood of the site Puraquequara, in the city of Manaus, in Amazonas State, Brazil. The work also shows were obtained 88 alleles, ranging from 3 to 10 alleles per locus, with an average of 6.0 alleles. The observed heterozygosity (HO) ranged from 0.157 to 0.866, while expected heterozygosity (HE) ranged between 0.322 to 0.843. The amplification of 15 heterologous microsatellite loci revealed four loci, amplified for all species (A. benarrochi, A. rangeli, A. oswaldoi and A. darlingi), and four amplified loci for at least one species. For the analysis of genetic variability eight loci were selected in which more polymorphism and number of individuals were genotyped. For those eight loci, 71 alleles were obtained with an average of 6.25 and 7.25 alleles per locus, at Puraquequara and Janauari river, respectively. Both population have shown observed heterozygosity ranging from respectively 0.318 to 0.937 and from expected 0.455 to 0.838, what indicates high genetic variability. The Wright's F statistics showed high genetic structure among populations (FST = 0.282), what is a fair indication of interspecific differentiation for complex species, what is confirmed, by one side, by the high figure for the genetic distance between the two populations (D = 1.832), and by another side, by the results of the implemented Bayesian analysis, performed with the aid of the computational software STRUCTURE , which revealed the existence of two clusters (K = 2) taking into account two distinct populations. |
| URI: | http://repositorioinstitucional.uea.edu.br//handle/riuea/2368 |
| Aparece nas coleções: | DISSERTAÇÃO - MBT Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia e Recursos Naturais da Amazônia |
Arquivos associados a este item:
Este item está licenciada sob uma Licença Creative Commons
